鸭IFN-β启动子区域IRF1结合位点荧光素酶报告质粒的构建与活性检测

作者：张蓉蓉; 王红琳; 卢琴; 张腾飞; 温国元; 罗青平; 汪最; 邵华斌^*

来源：湖北农业科学, 2019, S2: 433-435.

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.S2.114

• 鸭干扰素β启动子区域
• IRF1
• 荧光素酶报告质粒
• poly(I∶C)

构建并鉴定鸭Ⅰ型干扰素β(IFN-β)基因启动区域的IRF1结合位点荧光素酶报告基因载体,并进行转录活性分析。通过PCR方法从鸭脾脏cDNA中克隆得到鸭干扰素启动子区域IRF1结合位点,通过连接转化亚克隆至含萤火虫荧光素酶报告基因pGL4.2-basic载体上,构建得到4个重复鸭源IRF1结合位点的荧光素酶报告基因载体4×IRF1-luc;用JetPEITM转染试剂将构建的报告基因转染至鸭胚成纤维细胞系DEF,在poly(I∶C)的刺激下,荧光素酶活性显著增加。

• 单位
  湖北省农业科学院畜牧兽医研究所