树鼩感染相关细胞因子荧光定量PCR检测方法的建立

作者:李潇; 刘文宽*; 邱淑燕; 许多; 周志超; 田新贵; 李炽; 辜淑君; 周荣
来源:生物医学工程学杂志, 2019, 36(03): 407-413.
DOI:10.7507/1001-5515.201801036

摘要

树鼩是一种新型的优质实验动物模型。本研究针对树鼩感染相关的细胞因子白介素6(IL-6)、IL-8、IL-10、IL-17A、γ-干扰素(IFN-γ)及管家基因磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)建立荧光定量聚合酶链式反应检测方法。研究证明所建立方法具有良好的特异性。线性范围高点可达到1×1010 copies,低点则至10 copies(IL-6、IL-17A)、100 copies(IL-10、GAPDH)和1 000 copies(IL-8、IFN-γ)不等,在此区间各试剂线性相关系数R2均大于0.99。IL-6、IL-8、IL-10、IL-17A、IFN-γ和GAPDH最低检测值分别在8、8、4、8、128、4 copies。研究表明所建立的检测方法具有很好的特异性、灵敏度及较广的线性范围,适用于多重浓度范围的样品检测,可用于后续树鼩细胞因子的研究工作。

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