RIPK2介导自噬对高糖诱导的小鼠肾系膜细胞ROS、caspase-1及IL-1β表达的激活作用

作者：周路平; 陈娇; 徐勇^*; 黄炜; 龙洋; 丁静雅; 秦露丹

来源：基础医学与临床, 2018, 38(10): 1389-1396.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2018.10.005

• RIPK2
• 自噬
• 活性氧
• 糖尿病肾脏疾病

目的观察受体结合丝氨酸/苏氨酸激酶2(RIPK2)介导自噬对高糖诱导的肾系膜细胞(GMCs)ROS、caspase-1及IL-1β表达的调控。方法体外培养正常小鼠GMCs,高糖作为刺激因子,设计siRNA靶向沉默RIPK2表达并构建自噬双荧光(mRFP-GFP-LC3)标记体系,激光共聚焦显微镜观察自噬流变化;DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS水平;Western blot及RT-PCR检测RIPK2、LC3Ⅱ/Ⅰ、caspase-1、IL-1β蛋白及mRNA表达;ELISA检测IL-1β的分泌。结果 1)高糖呈时间-浓度依赖性增加细胞内ROS水平,诱导caspase-1和IL-1β表达(P<0.05)。2)短期(012 h)高糖刺激可诱导RIPK2和LC3Ⅱ/Ⅰ表达(P<0.05),超过12 h后RIPK2和LC3Ⅱ/Ⅰ表达下调(P<0.05)。3)siRNA靶向沉默RIPK2下调LC3Ⅱ/Ⅰ表达和细胞自噬流形成,上调细胞内ROS、caspase-1及IL-1β表达(P<0.05)。结论 RIPK2介导自噬负性调控高糖诱导的ROS、caspase-1及IL-1β表达,可能是防治糖尿病肾脏疾病(DKD)的新思路。

• 单位
  西南医科大学; 绵阳市第三人民医院