摘要

目的建立温度敏感型永生化神经前体细胞系,鉴定其细胞生长特点及表达抗原的特性。方法利用逆转录病毒感染原代培养的胚胎13d SD大鼠中脑神经前体细胞,建立温度敏感型永生化神经前体细胞系RMN,利用免疫细胞化学、Western blot和流式细胞分析方法测定RMN细胞的特征。结果在33℃条件下,RMN细胞呈多边形,有较短突起;细胞增殖迅速,群体倍增时间为48 h,可连续传代和冷冻保存;细胞表达SV40大T抗原,nestin蛋白和Nurr1蛋白;RMN细胞中未发现染色体倍体的异常,裸鼠接种20周后未观察到肿瘤的形成。在39℃条件下,RMN细胞增殖速度减缓,细胞形成较长突起。在含1%胎牛血清的培养基中培养1周后,RMN细胞可表达-βIII-tubulin,GFAP和Gal C等抗原,但SV40抗原表达减弱。结论RMN细胞系是SV40/tsA58基因永生化的大鼠神经前体细胞系,是具有温度敏感性及多分化潜能的前体细胞系。