利用CRISPR/Cas9技术敲除青花菜BoSP11创制自交亲和系

作者：马存发; 武婷; 赵辉; 张天培; 赵立坚; 余永辉; 肖建成; 李军; 巫水钦

来源：园艺学报, 2024, 51(03): 509-519.

DOI：10.16420/j.issn.0513-353x.2023-0065

• 青花菜
• 甘蓝
• CRISPR/Cas9
• 基因编辑
• BoSP11
• 自交亲和系

通过CRISPR/Cas9技术敲除SRK基因或者SP11基因可以直接将甘蓝类蔬菜自交不亲和材料改造成自交亲和材料。本研究中根据全基因组重测序获得青花菜（Brassica oleracea var.italic） BoSP11基因序列,构建双靶位点的CRISPR/Cas9基因编辑载体,利用农杆菌介导的遗传转化法对BoSP11进行敲除。结果显示,获得的29株转基因植株中有23株发生基因突变,编辑效率为79.3%。TA克隆测序结果表明有4株为纯合突变,19株为杂合突变。统计纯合突变T0代自交结籽情况发现花期自交亲和指数高达6.82,为目前所报道的能获得的亲和性最高指数。T1代植株在隔离大棚中通过蜜蜂授粉平均单株采收种子24.8 g,完全实现不需要人工干预完成亲本材料的自交繁育。

• 单位
  嘉兴职业技术学院