应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子Ⅱ结合蛋白

作者：杨艳杰; 成军; 陈东风; 钟彦伟; 张忠东; 王建军; 刘妍

来源：Y200401007, 2004, (01): 23-26.

• 噬菌体展示技术
• 肝炎病毒
• 乙型
• 抗原
• 表面
• 启动区(遗传学)
• 筛选 phage display
• hepatitis B virus
• antigens
• surface
• promoter regions (genetics)
• screening

目的　通过筛选乙型肝炎病毒 (HBV)表面抗原基因启动子Ⅱ(SPⅡ)结合蛋白 ,为HBV复制机制的研究探索新的途径。方法　应用噬菌体展示技术 ,以HBV的表面抗原基因启动子Ⅱ的聚合酶链反应 (PCR)产物DNA作为固相筛选分子 ,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行 5轮“吸附 洗脱 扩增”筛选过程 ,经噬斑的PCR扩增后 ,构建克隆载体 ,最后对所筛选克隆进行DNA序列测定和同源性分析。结果　噬菌体经富集后 ,从随机筛选的 2 0个克隆中得到 4个阳性克隆 ,成功构建了克隆载体。序列测定后经过同源性分析 ,确定了和HBVSPⅡ结合的肝细胞蛋白———尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 4 (NADHDH...

• 单位
  第三军医大学大坪医院; 解放军第302医院