T细胞死亡相关基因8对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

作者：罗红; 邵东华^*; 胡秀兰; 马晓冬

来源：江苏大学学报(医学版), 2019, 29(03): 226-231.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.y190030

• T细胞死亡相关基因8
• 脑缺血再灌注
• BTB09089
• siRNA

目的:探讨活化T细胞死亡相关基因8(T cell death associated gene 8,TDAG8)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法:将健康成年雄性SD大鼠132只采用随机数字表法分为6组:对照组(n=18),缺血再灌注组(I/R组,n=42),TDAG8激动剂BTB09089组(BTB组,n=18),空白载体组(空载体组,n=18),TDAG8-siRNA阴性对照组(siRNA阴性组,n=18)和TDAG8-siRNA组(siRNA组,n=18)。采用线栓法短暂性阻塞大鼠大脑中动脉(middle cerebral artery occlusion,MCAO)制备大鼠局灶性脑I/R模型。BTB组、空载体组、siRNA阴性组和siRNA组于缺血前72 h、48 h和24 h分别经侧脑室注射20μmol/L的BTB09089、空白转染试剂jetPEI、4μg siRNA阴性对照和4μg TDAG8-siRNA各8μL,其中空载体组、siRNA阴性组和siRNA组同时均注入等量转染试剂jetPEI。于再灌注6 h时每组取6只大鼠断头取脑,蛋白质印迹法检测缺血半暗带TDAG8、cleaved caspase-3、Bcl-2和TDAG8下游相关蛋白p-Akt、p-CREB的表达水平;于再灌注24 h和72 h时每组分别取6只大鼠评价神经功能并测定脑梗死体积百分比。结果:与对照组比较,其他5组再灌注6 h时缺血半暗带TDAG8、cleaved caspase-3、p-Akt和p-CREB表达均上调(均P <0. 05),Bcl-2表达下调(P <0. 05),再灌注24 h和72 h时脑梗死体积百分比明显升高、神经功能缺陷评分显著降低(均P <0. 05);与I/R组比较,BTB组再灌注6 h时TDAG8、Bcl-2、p-Akt和p-CREB水平上调(均P <0. 05),cleaved caspase-3表达下调(P <0. 05),再灌注24 h和72 h时脑梗死体积百分比显著降低,神经功能缺陷评分明显升高(均P <0. 05);与siRNA阴性组比较,siRNA组再灌注6 h时TDAG8、Bcl-2、p-Akt和p-CREB水平下调(P <0. 05),cleaved caspase-3表达上调(P <0. 05),再灌注后24 h和72 h脑梗死体积百分比显著升高,而神经功能缺陷评分明显降低(P <0. 05)。结论:活化TDAG8可能通过Akt信号通路调控短暂性大鼠MCAO诱导的脑缺血再灌注损伤。

• 单位
  江苏大学附属人民医院