一种黑曲霉高耐热β-葡聚糖酶基因的克隆、表达及重组酶性质分析

作者：韩冰; 王施岚; 德青美朵; 沈微^*; 陈献忠; 樊游

来源：食品与发酵工业, 2018, 44(11): 55-62.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.017330

• 内切-β-1
• 4-葡聚糖酶
• 黑曲霉
• 酶学性质
• 耐热

通过RT-PCR克隆、鉴定了黑曲霉中编码1种葡聚糖酶基因eglA6,所编码的重组酶蛋白命名为AneglA6。通过密码子优化提高了AneglA6在巴斯德毕赤酵母中的表达水平,对重组酶进行纯化并研究酶学性质,重组酶表观分子量约为52 ku。以大麦葡聚糖为底物时,重组酶比酶活为12 450. 6 U/mg;以CMC-Na为底物时,酶活是1 645. 7 U/mg;以酵母葡聚糖等β-1,3-葡聚糖为底物时,重组酶未表现出明显的活力。重组酶最适温度为75℃,在75℃和70℃下半衰期分别为1. 9和4. 6 h。AneglA6最适pH为4. 0,在pH 3. 0～5. 5范围内具有酶活力的50%以上。AneglA6是一种在酸性和高温条件下有较高活力和稳定性的耐热内切-β-1,4-葡聚糖酶。

• 单位
  工业生物技术教育部重点实验室; 江南大学