静注人免疫球蛋白(pH4)中抗-HBs效价双抗原夹心ELISA的验证

作者：李青; 潘孟姣; 刘莉娟; 赵小洁; 钱秋娟; 张继鹏; 何彦林

来源：微生物学免疫学进展, 2018, 46(01): 34-38.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2018.01.007

• 酶联免疫吸附试验
• 抗-HBs效价
• 方法学验证
• 放射免疫方法

目的用双抗原夹心ELISA检测静注人免疫球蛋白(p H4)(human immunoglobulin for intravenous injection,IVIG)中抗-乙型肝炎病毒表面抗体(HBs)效价并进行方法验证。方法依据2003年版《药品生产验证指南》,对用双抗原夹心ELISA进行专属性、重复性、中间精密度、线性、准确度、范围、耐用性的验证;并与放射免疫方法测定抗-HBs效价的结果进行比对。结果专属性验证中,6次独立试验的回收率在83.7%101.1%区间内;重复性试验中10、40、80、160 IU/L 4个浓度的3次重复检测结果的RSD均<20%;中间精密度验证结果显示,两位分析人员不同时间各测定6次,检测结果的RSD=5.2%,均<20%。F检验显示,人员和时间两因素在α=0.05水平上对检测结果均无统计学意义(P=0.41>0.05,F=2.19);线性验证中,抗-HBs免疫球蛋白国家标准品和IVIG成品各重复3次的相关系数r分别为0.984 3、0.990 7、0.982 2、0.991 7、0.988 3、0.992 5,均>0.980 0;在准确度验证中,3次重复检测结果的回收率为84.10%114.10%;耐用性结果显示,在试验加入终止液后0、3、6、9、12 min的测定结果均与0 min无统计学意义(Dunnett t test,α=0.05,P>0.05,t(3)=1.35<t0.05,t(6)=0.37<t0.05,t(9)=0.99<t0.05,t(12)=1.31<t0.05)。ELISA和放射免疫方法对IVIG中抗-HBs效价检测的结果差异无统计学意义(paired t test,α=0.05,P=0.07>0.05,t=2.27)。结论经验证,用双抗原夹心ELISA检测IVIG中抗-HBs效价,其专属性、重复性、中间精密度、线性、准确性、范围和耐用性均符合要求,该方法准确可靠、简便快速,可替代放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)用于IVIG中抗-HBs效价的测定。

• 单位
  兰州兰生血液制品有限公司