大黄不同炮制品和煎煮时间对TGF-β1诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞中E-cadherin和α-SMA浓度的影响

作者：李玉婷; 巴元明^*; 王林群; 胡刚明; 李伟男

来源：中医杂志, 2020, 61(03): 235-240.

DOI：10.13288/j.11-2166/r.2020.03.013

• 大黄
• 炮制
• 煎煮时间
• 人肾皮质近曲小管上皮细胞
• 慢性肾衰
• 上皮间充质转化

目的探讨不同大黄炮制品干预人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)的作用差异及筛选最佳的煎煮时间点。方法取生大黄、熟大黄、酒大黄、大黄炭饮片各350 g,均分为7份。每份药物分别煎煮5、7、9、10、15、20、30 min,最终制备浓度约1000 g/L药液。将145只大鼠随机分为生大黄组、熟大黄组、酒大黄组、大黄炭组,各组又分为5、7、9、10、15、20、30 min时间点的亚组,每个亚组5只,另设对照组5只。将各药物组大鼠分别给予相应的大黄煎剂以1. 35 g/(kg·d)的剂量灌胃,对照组大鼠给予0. 9%氯化钠2 ml灌胃,每日2次,第6日灌胃后制备含药血清。用大黄不同炮制品不同煎煮时间的含药血清干预经转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的HK-2细胞24 h,检测各组HK-2细胞中上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的浓度。结果α-SMA浓度最低的分别为生大黄10 min亚组(52. 086 ng/ml)、熟大黄10 min亚组(44. 596 ng/ml)、酒大黄9 min亚组(49. 768 ng/ml)、大黄炭9 min亚组(58. 470 ng/ml)。E-cadherin浓度最高的分别为生大黄10 min亚组(1. 017 ng/ml)、熟大黄10 min亚组(1. 325 ng/ml)、酒大黄9 min亚组(1. 163 ng/ml)、大黄炭9 min亚组(0. 787 ng/ml)。与大黄炭组比较,其余3组α-SMA浓度降低,E-cadherin浓度升高(P <0. 05或P <0. 01)。与熟大黄组比较,生大黄组和酒大黄组α-SMA浓度升高,E-cadherin浓度降低(P <0. 05或P <0. 01)。酒大黄组与生大黄组比较,α-SMA和E-cadherin浓度差异亦有统计学意义(P <0. 05)。结论大黄的四种炮制品均能有效抑制经TGF-β1诱导的HK-2细胞上皮间充质转化,其作用效果由强到弱依次均为熟大黄、酒大黄、生大黄、大黄炭,生大黄和熟大黄最佳煎煮时间为10 min,酒大黄和大黄炭最佳煎煮时间为9 min。

• 单位
  汉川市人民医院; 湖北省中医药研究院; 湖北省中医院; 襄阳市中医医院; 湖北中医药大学