碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌耐药机制研究

作者：汪玥; 孙自镛; 陈中举; 王斌; 田磊; 朱旭慧; 李丽; 张蓓; 朱琴

来源：中华检验医学杂志, 2012, 35(04): 339-344.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2012.04.011

• 肠杆菌科细菌
• 质粒
• 细菌外膜蛋白质类

目的探讨碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)的耐药机制,建立获得性碳青霉烯酶流行监测体系。方法收集华中科技大学同济医学院附属同济医院2007年1月至2010年6月临床分离非重复肠杆菌科细菌5604株,其中美罗培南抑菌环直径≤21 mm的肠杆菌科细菌100株。药物敏感性试验筛选出碳青霉烯类耐药菌株,采用聚合酶链反应(PCR)对碳青霉烯酶基因和基因附属结构进行分析;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和Southern印迹杂交方法分析耐药菌质粒;采用多位点序列分型(MLST)方法对菌株进行分型及分析同源性;采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)方法对菌株的外膜孔道蛋白进行分析。结果共检出CRE 11株,其中克雷伯菌属细菌7株。抗菌药物敏感性试验显示所有菌株对大多数抗菌药物耐药,最低抑菌浓度美罗培南8～64 mg/,L,亚胺培南4～64 mg/L,厄他培南4～64 mg/L,对氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗菌药物的敏感性则变化较大。PCR检出IMP4阳性菌株6株,KPC-2阳性菌株3株,其中1株Srr476型肺炎克雷伯菌同时携带bla_(IMP-4)和bla_(KPLC-2)。对基因附属结构进行分析,结果显示bla_(KPC-2)基因位于由Tn3转座子和Tn4401部分片段构成转座子上。PFGE显示大多数CRE含有3个或3个以上质粒。MLST分型发现2株肺炎克雷伯菌同属于sT476型。SDS-PAGE提示l株产酸克雷伯菌(Kox656)存在外膜孔道蛋白(OmpK35和OmpK36)双缺失。结论本院CRE主要是肺炎克雷伯菌,产生碳青霉烯酶是细菌耐药的主要原因,IMP-4是其主要酶型。碳青霉烯酶基因的出现和传播对治疗和感染控制造成巨大威胁,应重视医院细菌耐药性特点及耐药菌感染的临床流行病学资料,从而为临床合理用药提供参考。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院