Apelin-13对高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用

作者:周雨燕; 林帆; 叶志强; 朱鹏立*
来源:中国临床药理学杂志, 2021, 37(21): 2905-2909.
DOI:10.13699/j.cnki.1001-6821.2021.21.010

摘要

目的探讨Apelin-13对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护机制是否与沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)相关。方法实验分组分为4部分。实验Ⅰ,将HUVECs分为6组,分别为空白组(5.5 mmol·L-1糖)、模型组(33 mmol·L-1高糖)、各实验组(分别用1×10-9,1×10-8,1×10-7和1×10-6 mol·L-1 Apelin预处理+33 mmol·L-1高糖)。实验Ⅱ,将HUVECs分为4组,分别为空白组(5.5 mmol·L-1糖)、模型组(33 mmol·L-1高糖)、对照组(1×10-8 mol·L-1 Apelin)、实验组(用1×10-8 mol·L-1 Apelin预处理+33 mmol·L-1糖)。实验Ⅲ,将HUVECs分为2组,分别为空载质粒组(1×10-8 mol·L-1 Apelin预处理+33 mmol·L-1高糖)和APJ低表达组(1×10-8 mol·L-1 Apelin预处理+33 mmol·L-1高糖)。以上3个实验均用Western blot法检测高糖环境下SIRT1蛋白的表达水平。实验Ⅳ,将HUVECs分为5组,分别为空白组(5.5 mmol·L-1)、模型组(33 mmol·L-1高糖)、实验组(用1×10-8 mol·L-1 Apelin预处理+33 mmol·L-1高糖)、抑制剂组(33 mmol·L-1高糖+1×10-5 mol·L-1 EX527)、干预组(用1×10-8 mol·L-1 Apelin预处理+33 mmol·L-1高糖+1×10-5 mol·L-1 EX527)。用流式细胞术检测HUVECs的凋亡率。结果实验Ⅰ,空白组、模型组和1×10-9,1×10-8,1×10-7和1×10-6 mol·L-1 Apelin实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.51±0.06,0.30±0.05,1.02±0.07,1.12±0.10,1.14±0.10和1.05±0.10,模型组的SIRT1蛋白相对表达量与4个实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅱ,空白组、模型组、对照组和实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.82±0.09,0.59±0.05,0.77±0.05和0.72±0.06;模型组的SIRT1蛋白相对表达量与实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅲ,空载质粒组和APJ低表达组的SIRT1蛋白表达水平分别为0.94±0.13和0.71±0.17,差异有统计学意义(P<0.05)。实验Ⅳ,空白组、模型组、实验组、抑制剂组和干预组的细胞凋亡率分别为(13.60±0.92)%,(24.63±1.25)%,(12.73±1.00)%,(25.68±1.42)%和(10.25±2.30)%。模型组的细胞凋亡率与空白组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);抑制剂组的细胞凋亡率与干预组相比,差异有统计学意义(P<0.05);干预组的细胞凋亡率与实验组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Apelin-13减轻高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的机制与SIRT1信号通路无关。