中国白兔白介素-10基因的克隆、表达及其抗体的制备

作者：孟庆玲; 才学鹏; 乔军; 景志忠; 张艳; 田广孚; 郭爱疆

来源：中国实验动物学报, 2007, (03): 203-207.

• 白细胞介素-10基因
• 表达
• 抗体制备 Chinese white rabbit IL-10
• Gene
• Expression
• Antibodies
• preparation

目的克隆并表达中国白兔IL-10基因,制备抗IL-10多克隆抗体。方法运用RT-PCR对从ConA诱导后的中国白兔外周血单核细胞(PMBCr)总RNA中扩增IL-10基因,克隆后进行测序和遗传进化分析,同时将其亚克隆pET28a中,在大肠杆菌中诱导表达,并用纯化的表达产物制备多克隆抗体。结果该基因全长537 bp,编码178个氨基酸。与欧洲兔IL-10基因同源性很高,但与鼠、鸡、河豚和斑马鱼等不同物种IL-10基因差异较大。经IPTG诱导后,重组菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子质量为23.4×103的重组蛋白。Western blot分析表明,中国白兔IL-10基因已经表达。重...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 甘肃农业大学