基于TGF-β1/Smad3信号通路探讨lncRNA H19对慢性心力衰竭大鼠的影响

作者：王凌燕^*; 曹**; 梅洋; 张彬; 周诗晶

来源：康复学报, 2023, 33(06): 528-534.

• 心力衰竭
• 长链非编码RNA H19
• 微小RNA-200a
• TGF-β1/Smad3信号通路
• 心功能
• 心肌纤维化

目的：基于转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad同源物3(Smad3)信号通路探讨长链非编码RNA H19(lncRNA H19)和微小RNA(miRNA)-200a对慢性心力衰竭大鼠心功能及心肌纤维化的影响。方法：选择清洁级成年健康雄性SD大鼠60只，采用随机数字表法分为假手术组和模型组，分别12、48只。采用结扎法构建心力衰竭模型大鼠，造模成功后，按随机数字表法分为心力衰竭组、lncRNA H19阴性对照组（阴性对照组）、lncRNA H19过表达组（过表达组）、lncRNA H19过表达+miRNA-200a过表达组（联合过表达组），每组12只。阴性对照组、过表达组和联合过表达组分别于第1、4、7、10、13、16天在大鼠尾部通过静脉注射lncRNA H19阴性对照质粒5 mL/（kg·d）、lncRNA H19质粒5 mL/（kg·d）、lncRNA H19质粒5 mL/（kg·d）和miRNA-200a质粒2 mL/（kg·d）；心力衰竭组、假手术组仅注射等剂量生理盐水，1次/d。末次注射2 d后，采用心脏彩色多普勒超声仪检测大鼠心功能指标[左心室心脏射血分数（LVEF）、左心室短轴缩短率（LVFS）、左心室收缩末期内径（LVESD）、左心室舒张末期内径（LVEDD）]；采用Masson染色法检测大鼠心肌纤维化情况，测定胶原容积分数（CVF）；采用实时荧光定量PCR法检测大鼠心肌组织lncRNA H19、miRNA-200a转录水平；采用Western blot法检测大鼠心肌组织TGF-β1、Smad3蛋白表达水平。结果：与假手术组比较，其余4组LVEDD、LVESD和TGF-β1、Smad3蛋白表达水平及miRNA-200a转录水平均明显升高，LVFS、LVEF和lncRNA H19转录水平均明显降低（P<0.05）；与心力衰竭组、阴性对照组比较，过表达组和联合过表达组LVEDD、LVESD和TGF-β1、Smad3蛋白表达水平及miRNA-200a转录水平均明显降低，LVFS、LVEF和lncRNA H19转录水平均明显升高（P<0.05）；与过表达组比较，联合过表达组LVEDD、LVESD和TGF-β1、Smad3蛋白表达水平及miRNA-200a转录水平均明显升高，LVFS、LVEF均明显降低（P<0.05）,lncRNA H19转录水平差异无统计学意义（P>0.05）。假手术组大鼠心肌组织仅有少量胶原分布，组织细胞排列紧密无明显缝隙；与假手术组比较，心力衰竭组大鼠心肌组织出现大量增生的胶原，细胞排列不均匀，CVF明显升高（P<0.05）；与心力衰竭组、阴性对照组比较，过表达组大鼠心肌组织胶原增生明显缓解，细胞整齐分布，CVF明显降低（P<0.05）；与过表达组比较，联合过表达组大鼠心肌组织仍有大量胶原分布，细胞间隙扩大，CVF明显升高（P<0.05）。结论：lncRNA H19过表达可减轻心肌纤维化和心脏损伤程度，改善心功能，可能与调控TGF-β1/Smad3信号通路，抑制miRNA-200a表达有关。