miR-891a-5p通过CPEB1调控结肠癌细胞生物过程的机制研究

作者：张新燕; 赵国栋

来源：天津医药, 2023, 51(01): 14-19.

• 结肠肿瘤
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• miR-891a-5p
• 细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白1

目的 探讨miR-891a-5p通过细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白1(CPEB1)调控结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的机制。方法 运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qPCR）检测结肠癌组织、癌旁组织、人正常结肠上皮细胞和人结肠癌细胞中miR-891a-5p的表达；将LOVO细胞分为A组（不做任何处理）、B组（转染anti-miRcon）、C组（转染anti-miR-891a-5p）、D组（共转染anti-miR-891a-5p和si-con）、E组（共转染anti-miR-891a-5p和siCPEB1）、F组（转染miR-con）、G组（转染miR-891a-5p）;CCK-8法检测细胞增殖率、Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率；蛋白免疫印迹实验检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、胱天蛋白酶-3酶原（Pro-caspase-3）、裂解的胱天蛋白酶-3(C-caspase-3)、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）的蛋白表达；Transwell实验检测细胞迁移、侵袭；双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果 与癌旁组织相比，结肠癌组织miR-891a-5p表达升高，与正常结肠上皮细胞相比，结肠癌细胞中miR-891a-5p的表达均显著升高（P<0.05）。与B组相比，C组miR-891a-5p、Cyclin D1、N-cadherin、Vimentin蛋白表达下降，细胞增殖率、迁移、侵袭数量降低，C-caspase-3、CPEB1、E-cadherin蛋白表达和凋亡率升高（P<0.05）；与D组相比，E组miR-891a-5p、Cyclin D1、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平升高，细胞增殖率、迁移、侵袭数量升高，C-caspase-3、CPEB1、E-cadherin蛋白表达和凋亡率降低（P<0.05）。miR-891a-5p与CPEB1的3′-UTR存在连续的6个互补结合位点。与F组相比，G组WT-CPEB1荧光活性和CPEB1蛋白表达降低；与B组相比，C组WT-CPEB1荧光活性升高（P<0.05）。结论 miR-891a-5p可促进结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭，抑制凋亡，其作用机制可能与靶向抑制CPEB1有关。

• 单位
  中南大学湘雅医学院; 海口市人民医院