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摘要
目的 探究强心苷类单体化合物21-hydroxy-neriaside的抗胃癌作用及机制。方法 采用CCK-8法考察21-hydroxy-neriaside对胃癌HGC27、MGC803、GT0603和GT112细胞增殖的影响；观察21-hydroxy-neriaside对HGC27、MGC803、GT0603和GT112细胞形态的影响；考察21-hydroxy-neriaside对HGC27、GT0603和GT112细胞集落形成的影响；采用RNA测序探究21-hydroxy-neriaside抑制胃癌细胞增殖的可能机制；采用qRT-PCR验证RNA测序结果；考察shRNA-E2F转录因子5(E2F transcription factor 5,E2F5)对GT112细胞E2F5表达的影响；采用Western blotting检测21-hydroxy-neriaside对HGC27、GT0603和GT112细胞E2F5、骨髓细胞瘤病毒癌基因（cellular-myelocytomatosisviraloncogene,c-Myc）、细胞周期D1(Cyclin D1)、细胞周期E2(Cyclin E2)和剪切型聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶[cleaved poly(ADP-ribose)polymerase,cleaved PARP]蛋白表达的影响。结果 CCK-8实验、形态学观察和细胞克隆形成实验均表明21-hydroxy-neriaside具有抑制胃癌细胞增殖的活性，与时间和药物浓度呈正相关。RNA测序、qRT-PCR和shRNA-E2F5慢病毒转染实验表明21-hydroxy-neriaside通过调控E2F5影响细胞周期通路，从而抑制肿瘤细胞生长。Western blotting实验结果表明21-hydroxy-neriaside组细胞中E2F5、c-Myc、Cyclin D1和Cyclin E2蛋白表达水平均明显降低（P<0.05、0.01、0.001）,cleaved PARP蛋白表达水平显著升高（P<0.001）。结论 21-hydroxy-neriaside具有抗胃癌活性，能够通过下调E2F5表达来影响细胞周期通路相关蛋白，抑制胃癌细胞生长，从而促使肿瘤细胞凋亡。
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