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摘要
为探究不同饱和度硫酸铵在坛紫菜Porphyra haitanensis蛋白分离过程中对蛋白结构特征和抗氧化活性的影响，采用梯度饱和度(10%～60%)硫酸铵沉淀法从坛紫菜粗提液(crude extract of Porphyra haitanensis,CEPh)中制备分离蛋白，对分离蛋白的理化性质、结构和光谱特性等进行测定，并比较了分离蛋白的抗氧化活性差异。结果表明：超声波辅助磷酸盐缓冲液法的蛋白提取率最高，为55.28%;用硫酸铵对坛紫菜粗提液进行梯度分离，蛋白主要在40%～60%饱和度下沉出；紫外吸收光谱显示，当硫酸铵饱和度为30%～50%时，藻胆蛋白大量沉出；红外光谱显示，当硫酸铵饱和度超过50%时，773、1 155 cm~(-1)处出现了2个非蛋白吸收峰；圆二色光谱显示，坛紫菜蛋白以α-螺旋结构为主，其中，分离蛋白40%-PhPI的结构最为有序；SDS-PAGE凝胶电泳显示，低饱和度(10%～30%)硫酸铵会显著增加相对分子质量为55 000、20 000和18 000的蛋白析出；抗氧化活性试验显示，不同饱和度硫酸铵提取获得的坛紫菜分离蛋白均具有一定的抗氧化活性，但活性强弱存在显著性差异(P<0.05)。研究表明，用不同饱和度硫酸铵得到的分离蛋白均表现出体外抗氧化活性，但蛋白结构特性与抗氧化活性存在较大差异。
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