微小RNA-508-3p靶向调控配对盒基因2影响肺癌细胞生物学特性的分子机制研究

作者：张吉炯; **^*

来源：实用临床医药杂志, 2022, 26(02): 62-75.

• 肺癌
• 微小RNA-508-3p
• PAX2基因
• RNA干扰
• 侵袭
• 凋亡

目的 探讨微小RNA-508-3p(miR-508-3p)在肺癌组织中的表达及其对肺癌细胞增殖活力、侵袭能力、凋亡率的影响与机制。方法 采用定量聚合酶链反应(qPCR)法和蛋白质印迹法(Western blotting)检测肺癌组织中miR-508-3p和配对盒基因2(PAX2)表达，分析两者的相关性。分别用miR-508-3p模拟物(miR-508-3p组)、模拟物阴性对照miR-NC(miR-NC组)、PAX2 siRNA si-PAX2(si-PAX2组)、siRNA阴性对照(si-NC组)、miR-508-3p抑制剂anti-miR-508-3p(anti-miR-508-3p组)、抑制剂阴性对照anti-miR-NC(anti-miR-NC组)、共转染miR-508-3p和PAX2过表达质粒pcDNA-PAX2(miR-508-3p+pcDNA-PAX2组)、共转染miR-508-3p和空白质粒pcDNA-NC(miR-508-3p+pcDNA-NC组)转染肺癌A549细胞，并设置空白组。采用噻唑蓝(MTT)法检测24～72 h的细胞增殖活力；采用Transwell小室及流式细胞术分别检测细胞侵袭能力及凋亡率，采用Western blotting检测A549细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。根据双荧光素酶活性检测结果评估miR-508-3p对PAX2的靶向调控。结果 肺癌组织miR-508-3p表达低于癌旁组织，PAX2 mRNA和PAX2蛋白表达高于癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.05); PAX2蛋白和miR-508-3p的表达呈显著负相关(P<0.05)。与空白组比较，miR-508-3p组Bax表达和细胞凋亡率均升高，MMP-2、Bcl-2蛋白表达和增殖活力、侵袭能力均降低，差异有统计学意义(P<0.05);与si-NC组比较，si-PAX2组PAX2、MMP-2、Bcl-2表达降低，Bax表达、凋亡率升高，增殖活力和侵袭能力降低，差异有统计学意义(P<0.05)。miR-508-3p靶向PAX2基因，调控PAX2蛋白的表达。PAX2可以逆转miR-508-3p对A549细胞增殖活力、侵袭能力以及细胞凋亡的影响。结论 miR-508-3p在肺癌组织低表达，其过表达可降低A549细胞增殖活力及侵袭能力，诱导细胞凋亡，机制与靶向调控PAX2基因有关。

• 单位
  黄石市中心医院