狂犬病病毒CVS株核蛋白基因的原核表达、纯化及鉴定

作者：李江涛; 李轶女; 殷相平; 邹媛媛; 张志芳; 柳纪省

来源：生物技术通报, 2008, (03): 103-106.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2008.03.018

• 狂犬病病毒
• 核蛋白
• 原核表达 Rabies virus Nucleoprotein Prokaryotic expression

用RT-PCR技术对狂犬病病毒(RV)CVS株核蛋白(N)基因进行扩增,经克隆与序列分析,该基因编码450个氨基酸残基。将目的基因克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建了重组质粒pET-N,将其转化表达菌BL21(DE3),于37℃1.0mmol∕L IPTG条件下诱导表达。大肠杆菌菌体裂解产物经SDS-PAGE电泳分析,在分子量约为54kD处出现一新蛋白带,和预期的目的蛋白的分子量相符。质谱鉴定的结果表明成功表达了RV N蛋白,为狂犬病的进一步研究奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院生物技术研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所