健胃消食口服液的免疫调节作用及网络药理学机制研究

作者：张艳; 赵海誉; 侯红平; 王琳娜; 姜珊; 周严严; 司南; 王宏洁; 王坤; 王丽芳; 倪理琪^*; 魏晓露^*

来源：中国现代中药, 2023, 25(10): 2147-2159.

DOI：10.13313/j.issn.1673-4890.20230511001

• 免疫抑制小鼠模型
• 健胃消食口服液
• 免疫调节
• T淋巴细胞亚群
• 三羧酸循环

目的：通过小鼠免疫功能抑制模型探讨健胃消食口服液的免疫调节作用，同时整合网络药理学方法探讨健胃消食口服发挥液健胃消食作用的机制。方法：按体质量随机分为对照组，模型组，阳性药及健胃消食口服液低、中、高剂量(0.62、1.24、2.48 g·kg–1)组，腹腔注射环磷酰胺制备小鼠免疫功能抑制模型。观察小鼠表观状态、体质量、脾指数和胸腺指数变化；运用淋巴细胞转化实验和B细胞抗体生成实验检测小鼠细胞免疫和体液免疫能力；结合流式细胞术检测淋巴细胞中辅助性T细胞(CD4+T)和细胞毒性T细胞(CD8+T)细胞比例，观察T淋巴细胞亚群的变化；应用中医药整合药理学研究平台(TCMIP) V2.0预测健胃消食口服液的潜在活性成分与靶点；根据主治病症临床表现，以“Gastritis”“Anorexia”为关键词在Gene Cards等数据库获取疾病靶点；利用Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用网络，筛选健胃消食口服液核心作用靶点；使用欧易云平台对核心靶点进行基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析；应用液相色谱-质谱法检测脾脏中三羧酸循环代谢产物以初步了解代谢与免疫之间的关系。结果：体外实验证明，与对照组比较，模型组小鼠体质量持续下降。与模型组比较，给药组小鼠体质量从给药后第4天开始相继出现不同程度恢复，饮食、反应状态、蜷缩弓背情况也有不同程度的改善；给药组小鼠脾脏体比、胸腺脏体比及小鼠脾淋巴细胞转化能力和B细胞抗体生成能力显著提高。通过筛选得到健胃消食口服液中95个成分、650个成分靶点及1490个疾病靶点。结合Cyto NCA插件筛选到56个核心靶点。富集分析发现，健胃消食口服液健胃消食的相关机制与C型凝集素受体信号通路和辅助性T细胞17(Th17)细胞分化等免疫通路有关。三羧酸循环中琥珀酸、二磷酸腺苷、乌头酸、柠檬酸、丙酮酸的代谢产物含量均呈现上升趋势，但是无剂量相关性。结论：初步揭示了健胃消食口服液的免疫相关作用机制，为健胃消食口服液的临床应用提供依据。

• 单位
  中国中医科学院中药研究所