脊髓损伤修复相关10号蛋白在COS7细胞中的表达、纯化与鉴定

作者：唐宁; 阙海平; 刘少君

来源：生物技术通讯, 2010, (05): 637-640.

• 脊髓损伤修复相关10号蛋白
• 真核表达
• COS7细胞
• 金属螯合层析 spinal cord injury and regeneration related protein No.10
• eukaryotic expression
• COS7 cells
• metal chelate chromatography

目的:在COS7细胞中表达脊髓损伤修复相关10号蛋白(SCIRR10),并对表达产物进行纯化和鉴定。方法:在实验室前期研究基础上,用PCR方法扩增SCIRR10基因,将其克隆入pcDNA3.1/myc-HisA穿梭质粒中,转染COS7细胞进行表达;对表达产物用金属螯合层析方法纯化,并进行SDS-PAGE和Western印迹检测。结果及结论:构建了含有SCIRR10基因的穿梭质粒pcDNA3.1/myc-His-SCIRR10,并使其在COS7细胞中得到表达,纯化后的重组蛋白SCIRR10-His-myc的纯度在80%以上,可用于下一步的实验研究。

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所