摘要
目的研究质谱技术检测载脂蛋白A-I和载脂蛋白B的多肽释放情况,为准确定量蛋白提供依据。方法方法学研究。确定载脂蛋白A-I和B的目标肽段。以目标肽段为检测对象,用同位素稀释液相色谱串联质谱法测定5份市售人血清样本中的载脂蛋白A-I和B,浓度范围分别为0.90~2.54 g/L和0.54~1.39 g/L。计算不同时间点的多个肽段释放量和速率,并绘制散点图。计算不同样本间,肽段释放量的相关系数R2。结果多数肽段在4 h内即达释放峰值。Apo A-Ⅰ的肽段VQ、DY和VS,以及Apo B的肽段TE和FP生成速度相对较慢。达到峰值后,TEV/SIL-TEV、AK/SILAK和VQ/SIL-VQ的比值相对稳定。对于Apo A-I,不同肽段之间的相关性较高,R2在0. 904~0. 999之间;对于APo B,部分肽段之间的相关性较低,如TG-SV的R2=0. 543 (3 h)。结论Apo A-I和Apo B不同肽段的酶解释放情况不同,合适的选择代表性肽段和酶解条件将有助于准确定量目标蛋白。
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单位上海市临床检验中心