RNA结合蛋白Rbm38在小鼠胚胎造血发育中的功能研究

作者：吴知晓; 宁小伟; 赵海鑫; 周杰; 柳迪; 刘兵^*; 兰雨^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(05): 876-883.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2022.05.014

• Rbm38
• 造血发育
• 造血干细胞
• 主动脉-性腺-中肾区

目的：探究RNA结合蛋白Rbm38在小鼠造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)发育中的作用。方法：分析造血干细胞发育过程中连续群体的单细胞转录组数据，筛选生血内皮细胞(hemogenic endothelial cell,HEC)和/或造血干细胞前体(hematopoietic stem cell precursor,pre-HSC)阶段表达上调的RNA结合蛋白分子(RNA binding protein,RBP)；利用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除小鼠模型，将杂合型小鼠交配获得实验用胚胎，按照小鼠胚胎基因型不同将实验分为实验组和对照组，实验组为Rbm38-/-基因型胚胎，对照组为Rbm38+/+和Rbm38+/-基因型胚胎；取材胚胎期11.5 d(embryonic day 11.5,E11.5)孕鼠胚胎的卵黄囊(yolk sac,YS)，行体外造血细胞集落形成实验(colony forming unit-culture,CFU-C)检测主动脉-性腺-中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)区和卵黄囊生成造血祖细胞(hematopoietic progenitor cell,HPC)的能力，行小鼠胚胎AGM区移植实验评价AGM区产生功能性造血干细胞的能力。结果：(1)Rbm38在动脉内皮细胞(arterial endothelial cell,AEC)向生血内皮细胞和Ⅰ型造血干细胞前体(type 1 pre-hematopoietic stem cell,T1 pre-HSC)的转化过程中表达明显上调，且在后续造血干细胞成熟的过程中维持高水平表达；(2)实验组和对照组E11.5小鼠胚胎AGM区和卵黄囊生成造血祖细胞数量以及其分化功能无统计学差异(P>0.05);(3)实验组和对照组移植后外周血嵌合率无统计学差异(P>0.05)。结论：(1)多种RNA结合蛋白分子，如Rbm38，在小鼠生血内皮细胞与Ⅰ型造血干细胞前体阶段特异性高表达；(2)敲除Rbm38不影响小鼠胚胎AGM区和卵黄囊生成造血祖细胞的能力；(3)敲除Rbm38不影响小鼠胚胎AGM区产生功能性的造血干细胞。

• 单位
  暨南大学; 中国人民解放军军事科学院; 解放军总医院; 公共卫生学院