外源性NAD+对小胶质细胞激活诱导神经干细胞凋亡的作用及机制研究

作者：李静岚; 王宇航; 李智磊; 王勇^*

来源：中国临床药理学杂志, 2019, 35(12): 1263-1277.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2019.12.011

• 神经干细胞
• 凋亡
• 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸
• 沉默调节蛋白3
• WNT信号通路

目的研究外源性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)对β-淀粉样蛋白(Aβ)介导小胶质细胞激活诱导神经干细胞凋亡的作用及对SIRT3/WNT信号通路的影响。方法利用Transwell系统共培养小鼠神经干细胞系C17.2(NSC)与小胶质细胞系BV-2,将C17.2细胞随机分为4组:空白组在下室培养C17.2细胞;对照组在下室培养C17.2细胞,并添加10μmol·L-1NAD+作用;模型组在上室培养BV-2细胞,下室培养C17.2细胞,并添加10μmol·L-1Aβ作用;实验组在上室培养BV-2细胞,下室培养C17.2细胞,10μmol·L-1NAD+预处理2 h后添加10μmol·L-1Aβ作用。以流式细胞术检测NSC凋亡率,以蛋白免疫印迹法检测NSC中SIRT3、DVL2、DVL3、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达情况。结果干预48 h,空白组、对照组、模型组及实验组NSC凋亡率分别为(4.88±0.62)%,(4.21±0.28)%,(8.06±0.24)%,(4.92±0.36)%。外源性NAD+添加能降低小胶质细胞激活诱导的NSC凋亡率升高(P<0.01)。蛋白免疫印迹法检测可见,与模型组比较,实验组细胞SIRT3、DVL2、DVL3、GSK3β、p-GSK-3β蛋白表达量升高(P<0.01),且与NAD+的作用时间具有相关性。结论 NAD+可抑制Aβ介导小胶质细胞激活诱发的NSC凋亡,与显著调节SIRT3及WNT信号通路中DVL2、DVL3、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达相关。

• 单位
  南方医科大学珠江医院