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摘要
目的 观察补阳还五汤对小窝蛋白1敲除(Cav-1-/-)小鼠脑缺血后N~6-甲基腺嘌呤（m~6A）甲基化和血管新生的影响,探讨其可能的作用机制。方法 将雄性野生型小鼠（WT）及Cav-1-/-小鼠（KO）随机分为对照组、模型组和补阳还五汤组（18.5 g/kg）,采用大脑中动脉栓塞法制备脑缺血模型,补阳还五汤干预7 d后对小鼠进行神经行为学评分,检测缺血侧皮质m6A甲基化水平,HE染色观察缺血侧皮质病理变化,免疫荧光双标法检测缺血侧皮质血管新生情况,qRT-PCR检测缺血侧皮质甲基转移酶样3 （METTL3）、甲基转移酶样14 （METTL14）、肾母细胞瘤1相关蛋白（WTAP）、肥胖相关蛋白（FTO）及AlkB同系物5 （ALKBH5）mRNA表达。结果 与同基因型对照组比较,WT、KO模型组小鼠神经行为学评分及缺血侧皮质m~6A甲基化水平明显升高（P＜0.01）,缺血侧皮质出现病理形态损伤,血管性血友病因子（VWF）/Ki-67双标阳性细胞数明显增加（P＜0.01）,KO模型组小鼠缺血皮质区WTAP mRNA表达明显升高（P＜0.01）,FTO和ALKBH5mRNA表达明显下降（P＜0.01）;与同基因型模型组比较,WT、KO补阳还五汤组小鼠神经行为学评分及m~6A甲基化水平明显降低（P＜0.01,P＜0.05）,缺血侧皮质病理形态损伤改善,VWF/Ki-67双标阳性细胞数目明显增加（P＜0.05）,KO补阳还五汤组小鼠缺血皮质区WTAP mRNA表达明显降低（P＜0.01）,FTO和ALKBH5mRNA表达明显升高（P＜0.01,P＜0.05）。且WT模型组和WT补阳还五汤组各项指标优于KO组（P＜0.01,P＜0.05）。结论 补阳还五汤可能通过Cav-1调控脑缺血小鼠m~6A甲基化水平和血管新生,从而发挥保护脑缺血损伤作用。
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