XJT-9503高温中性蛋白酶基因Gp1的克隆、表达及序列分析

作者：冯蕾杨新平古丽努尔陈竞

来源：皮革科学与工程, 2005, (04): 26-30.

• 地衣芽孢杆菌
• 高温中性蛋白酶
• 基因的克隆和表达
• 序列分析
• 大肠杆菌 bacillus licheniformis
• thermophilic netural protease
• gene cloning and espression
• sequential analysis
• E.coli

试验根据地衣芽孢杆菌XJT9503的高温中性蛋白酶酶蛋白所测定的N-端及部分肽段氨基酸序列及质谱分析结果设计了PCR引物,用PCR方法从地衣芽孢杆菌XJT9503中扩增了高温中性蛋白酶基因Gp1,对所获得的基因进行序列分析测定,并与蛋白酶的氨基酸序列分析对比。GP1基因全序列共1129bp,包括整个阅读框,共编码376个氨基酸。将扩增的DNA片段插入到大肠杆菌载体pET-28a中,构建成重组分泌型表达载体pGp1。并在大肠杆菌宿主BL21中得到表达。SDS-PAGE分析显示产物的分子量为27.0×103,同核酸序列测定所推导的值相符。同时,对地衣芽孢杆菌XJT9503中性蛋白酶基因序列进行了测...