目的探寻提高大鼠胰岛分离纯化技术的方法。方法通过用胶原酶灌注分离纯化胰岛,用双硫棕染色,台盼蓝染色和胰岛素释放试验来鉴定胰岛的数量、形态和功能。结果改进方法后穿刺灌注成功率达96.7%,分离纯化后每只大鼠可获得483±83个胰岛,胰岛存活率及纯度均90%以上,胰岛素释放指数为2.4462±0.1187。结论良好的胶原酶灌注消化和梯度离心可以获得形态和功能均良好的胰岛。