抑制Hedgehog信号通路对肝细胞癌细胞生长和迁移的影响

作者：王子豪; 段菲; 江翰; 李永盛; 边睿; 施伟斌

来源：中华实用诊断与治疗杂志, 2014, 28(10): 979-982.

DOI：10.13507/j.issn.1674-3474.2014.10.017

• 肝细胞癌
• Hedgehog信号通路
• GDC-0449
• GANT61

目的探讨Hedgehog(Hh)信号通路在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中的作用及其机制。方法选取2株HCC细胞系HepG2和Hep3B分成6组,分别为HepG2空白对照组、HepG2/GDC-0449组、HepG2/GANT61组、Hep3B空白对照组、Hep3B/GDC-0449组、Hep3B/GANT61组。HepG2/GDC-0449组、Hep3B/GDC-0449组采用GDC-0449(靶向SMO),HepG2/GANT61组、Hep3B/GANT61组采用GANT61(靶向GLI1/2)Hh信号通路抑制剂处理。采用实时PCR检测HCC细胞Patched1、Smoothened、Glioma1、vimentin和E-cadherin mRNA表达水平,采用Western blot实验检测Patched1、Smoothened、Glioma1蛋白表达水平,采用克隆形成实验观察存活克隆计数与死亡细胞计数。结果 HepG2/GDC-0449组和HepG2/GANT61组与HepG2空白对照组比较,Hep3B/GDC-0449组和Hep3B/GANT61组与Hep3B空白对照组比较,Patched1、Smoothened和Glioma1mRNA及蛋白表达均下调,存活克隆计数减少,死亡细胞计数增多,E-cadherin mRNA表达水平增高,vimentin mRNA表达水平降低(P<0.05);HepG2/GANT61组较HepG2/GDC-0449组抑制作用更明显,Hep3B/GANT61组较Hep3B/GDC-0449组抑制作用更明显(P<0.05)。结论 GDC-0449和GANT61 2种抑制剂均可有效抑制HepG2和Hep3B细胞增殖、迁移和上皮间叶细胞转化,增加细胞凋亡,其中GANT61抑制作用更明显。抑制Hh信号通路可有效影响HCC细胞的生长和迁移。

• 单位
  上海交通大学医学院附属新华医院; 上海交通大学医学院附属第九人民医院