DNA-Lipid探针用于细胞膜外pH值的原位成像

作者：周文玉^*; 汤娉婷; 杨荣华; 郑晶^*

来源：分析测试学报, 2019, 38(02): 154-158.

• 缺氧环境
• 细胞外pH值
• i-motif结构
• 二酰基脂质体
• 荧光共振能量转移
• 成像分析

将二酰基脂质体自动偶联到两端标有Cy3和Cy5的具有i-motif结构的DNA链上,形成二酰基脂质体-DNA共轭物(DNA-lipid)探针。二酰基脂质体与细胞膜之间强烈的疏水作用可使该探针直接插入细胞膜表面,实现缺氧和常氧条件下细胞外pH值的比率型检测。在高pH值条件下,具有i-motif结构的DNA链两端的荧光基团处于分离状态,无FRET效应;在低pH值条件下,具有i-motif结构的DNA链在细胞膜表面形成四聚体结构,两端的荧光基团相互靠近,产生强的FRET效应。通过测定两种荧光基团的荧光强度比值实现了pH值的定量检测。利用此探针对pH值的灵敏响应实现了对缺氧环境中细胞外pH值的精确测量,在生理病理学上具有重大意义。

• 单位
  化学化工学院; 生物工程学院; 长沙理工大学; 湖南大学