外泌体源性oar-miR-10b在绵羊痘病毒感染绵羊睾丸细胞中的动态表达及靶基因的鉴定

作者：孔贺磊; 吴金恩; 郑亚东; 何贵天; 李雅婷; 丁军涛^*

来源：动物医学进展, 2018, 39(12): 42-48.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2018.12.009

• oar-miR-10b
• BCL2L2
• 实时荧光定量PCR
• 双荧光素酶报告系统

以绵羊痘病毒(SPPV)感染绵羊睾丸细胞4h后外泌体中miRNAs的高通量测序结果为基础,应用RT-qPCR分析SPPV感染绵羊睾丸细胞4h、24h、48h和72h后外泌体中oar-miR-10b的动态表达;用双荧光素酶报告载体鉴定oar-miR-10b的靶基因。结果显示,在SPPV感染的不同时期,oar-miR-10b呈先增加后减少的趋势,特别是感染后24h的差异表达量为2.15倍;PmirGLO-BCL2L2-WT+oar-miR-10b mimics共转染组与PmirGLO-BCL2L2-WT+miRNA Negative Control对照组相比差异极显著(P <0.01),证实BCL2L2为oar-miR-10b的靶基因。结果表明,oar-miR-10b在SPPV感染的不同时期呈差异性表达,其靶基因为BCL2L2,为深入研究oar-miR-10b在SPPV感染中的作用机制奠定基础。

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室