噬夏孢欧文氏菌类crtB基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

作者：汪靖超; 姜颖; 杜桂彩; 郭道森; 李荣贵

来源：青岛大学学报(自然科学版), 2006, (02): 74-78.

• Erwinia uredovora
• crtB
• 八氢番茄红素合成酶
• 表达
• 纯化 Erwinia uredovora
• phytoene synthase
• expression
• purification

噬夏孢欧文氏菌类胡萝卜素合成相关基因crtB,编码八氢番茄红素合成酶。利用PCR技术扩增出crtB基因,克隆进表达载体,构建表达质粒pET-15bcrtB。重组质粒转化大肠杆菌,构建工程菌株。经IPTG诱导,工程菌高效表达了重组八氢番茄红素合成酶,表达量占菌体总蛋白的40%。重组蛋白以包含体形式存在,包含体经洗涤、尿素溶解、复性并经镍离子树脂亲和层析、Superdex 75凝胶层析柱纯化,得到了电泳纯的重组八氢番茄红素合成酶,带有His-tag的该蛋白分子量为35 kDa,pI值为7.3。

• 单位
  青岛大学