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摘要
目的 制备新型冠状病毒E蛋白和抗E蛋白多克隆抗体。方法 原核质粒pMAT9s-2019-nCoV-E经鉴定验证正确后，转化BL21感受态细胞，IPTG诱导表达目的蛋白，经尿素梯度复性、Ni柱层析获得纯化的重组E蛋白，免疫兔获抗E多克隆抗体。真核重组质粒pcDNA3.1(+)-2019-nCoV-E经鉴定后提取质粒，免疫家兔获抗E多克隆抗体，通过Western blot和间接ELISA测定多克隆抗体特异性及效价。结果 原核、真核重组质粒鉴定正确，重组E蛋白以包涵体形式表达分子质量单位约为53 ku; ELISA法测定抗E多克隆抗体效价分别达1∶16 000和1∶12 800。Western blot显示，重组E蛋白能被抗SARS-CoV-2 E多克隆抗体识别。结论 获得重组E蛋白及兔源抗SARS-CoV-2 E多克隆抗体，可为新冠病毒感染的血清抗体筛查、抗原蛋白检测，以及药物靶点研究、E蛋白生物学特性研究和新冠快速检测试剂的研发提供支持。
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单位基础医学院; 潍坊医学院
