热打击诱导血管内皮细胞组织因子早期表达分泌的初步研究

作者:钱晶; 王凡凡; 万露露; 杨加乐; 施学智; 童华生; 周伟梁
来源:解放军医学杂志, 2023, 48(12): 1412-1419.
DOI:10.11855/j.issn.0577-7402.0408.2023.0807

摘要

目的 探讨热打击诱导血管内皮细胞组织因子(TF)早期表达分泌的规律。方法 将30只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组与热打击后复温0、3、6、9 h组(n=6)。热打击组小鼠暴露于动物孵箱热环境,核心温度达42.5℃时即为发生重症中暑。采用HE染色观察小鼠肝脏、肺脏及肾脏组织病理学变化;RT-qPCR检测小鼠组织TF mRNA表达水平;ELISA法检测小鼠血浆TF浓度。体外建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)热打击模型,分为对照组与热打击后复温0、3、6、9 h组。采用RT-qPCR、Western blotting及细胞免疫荧光化学技术分别检测HUVECs中TF mRNA及蛋白表达水平;采用ELISA法检测HUVECs培养上清中TF水平。结果 对照组小鼠各组织未见明显病理损伤,热打击复温小鼠存在不同程度组织细胞结构性损伤及出血性、炎症性损伤。与对照组小鼠比较,热打击复温0、3 h组肾脏(1.719±0.018、1.241±0.178 vs. 1.000±0.063)、复温3 h组肺脏(2.444±0.511 vs. 1.000±0.106)及复温6 h组肝脏(7.312±0.618 vs. 1.000±0.147)中TF m RNA表达量均明显升高(P<0.05)。热打击小鼠复温0、3、6、9 h组血浆TF水平均较对照组小鼠升高[(132.426±17.920) pg/ml、(119.400±10.267) pg/ml、(107.374±13.495) pg/ml、(163.767±22.810) pg/ml vs.(75.479±13.831) pg/ml,P<0.01]。与对照组比较,热打击后复温6、9 h组HUVECs的TF mRNA表达水平明显升高(1.905±0.354、2.564±0.297 vs. 1.000±0.097,P<0.01);热打击复温0、3、6、9 h组HUVECs培养上清TF水平均明显高于对照组[(36.309±4.101) pg/ml、(38.425±5.484) pg/ml、(41.655±4.380) pg/ml、(43.586±4.718) pg/ml vs.(14.996±0.254) pg/ml,P<0.01]。结论 热打击血管内皮细胞中TF的早期表达分泌增加,可能是重症中暑循环TF的主要来源之一。

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