重组酶介导扩增技术快速检测食品中单核细胞增生李斯特菌

作者：崔荣飞; 赵义良^*; 田梅; 赵永坡; 曹楠; 王丽娟; 郭利川

来源：食品安全质量检测学报, 2021, 12(05): 1773-1777.

DOI：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2021.05.026

• 单核细胞增生李斯特菌
• 重组酶介导扩增
• 分子检测

目的建立重组酶介导扩增技术(recombinase aided amplification,RAA)快速检测单核细胞增生李斯特菌的方法。方法以单核细胞增生李斯特菌的hlyA基因作为靶序列,设计引物和探针,通过构建含目的基因片段的重组质粒,评价RAA方法的灵敏度,通过检测沙门氏菌核酸、金黄色葡萄球菌核酸、副溶血性弧菌核酸、溶血性链球菌核酸、志贺氏菌核酸基因组DNA,评价其特异性。结果建立的RAA方法可在39℃、20 min内,检测重组质粒中hlyA基因片段,最低可检出的质粒拷贝数为10拷贝/反应,且与沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、溶血性链球菌、志贺氏菌基因组DNA无交叉反应。结论建立的RAA方法具有灵敏度高和特异性强的特点,可用于单核细胞增生李斯特菌的快速检测。

• 单位
  江苏奇天基因生物科技有限公司; 石家庄市农林科学研究院