奶牛瘤胃微生物元基因组文库中脂肪酶的筛选与酶学性质

作者：赵圣国; 王加启; 刘开朗; 朱雅新; 卜登攀; 李旦; 于萍

来源：生物工程学报, 2009, (06): 869-874.

DOI：10.13345/j.cjb.2009.06.023

• 瘤胃微生物
• 元基因组文库
• 脂肪酶
• 底物特异性
• 最适pH
• 热稳定性 rumen bacterium
• metagenome library
• lipase
• substrate
• optimum pH
• thermo stability

利用含有三油酸甘油酯的脂肪酶选择性筛选培养基,从奶牛瘤胃微生物元基因组文库15360个克隆中,筛选得到了18个脂肪酶阳性克隆,其插入片段大约为60kb,并且各个克隆的插入片段各不一样。利用p-NPP法对脂肪酶克隆的脂肪酶活性分析,表明均具有大小不等的脂肪酶活性。底物特异性分析表明Lipase6、Lipase7和Lipase8分别对C16底物(对硝基苯棕榈酸酯)、C12底物(对硝基苯月桂酸酯)和C16底物(对硝基苯棕榈酸酯)水解能力最强。Lipase6、Lipase7、Lipase8的脂肪酶最适pH为7.5;Lipase8的脂肪酶活性半衰期随反应温度的升高而缩短,70oC时能达到30min。本研...

• 单位
  微生物资源前期开发国家重点实验室; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 甘肃农业大学; 动物营养学国家重点实验室; 中国科学院微生物研究所