蛋白质的曙红Y-中性红逆向能量转移荧光法测定

作者：刘保生; 薛春丽; 王晶; 吕云开

来源：分析测试学报, 2009, 28(03): 345-348.

• 曙红Y
• 中性红
• 荧光能量转移
• 蛋白

在pH2.35的B-R缓冲溶液中,酸性染料曙红Y(EY)与碱性染料中性红(NR)之间由于静电吸引能够发生有效的能量转移,使能量受体NR荧光增强,能量给体EY的荧光猝灭。在该体系中加入人血清白蛋白(HSA),由于竞争作用使得HSA的加入破坏了EY-NR间的能量转移,产生了明显的逆向反应,并且生成HSA-EY络合物,利用该络合物的荧光增加强度与HSA含量间的线性关系建立了一种测定微量血清蛋白的新方法。结果表明,血清蛋白工作曲线线性范围为0.6～12.0mg/L;方法检出限为0.25mg/L;6次平行测定相对标准偏差为1.94%～4.58%;回收率为96%～105%。该方法的稳定性好、选择性高,直接用于人血清试样中总蛋白含量的测定,实验结果与常用的双缩脲法基本一致。

• 单位
  河北大学