IP3R2结构域对三穗鸭子宫内膜上皮细胞Ca2+分泌的影响

作者：杨酸; 谭光辉; 张依裕; 游敏芳; 廖朝美; 谭元成; 王盈童

来源：农业生物技术学报, 2022, 30(06): 1153-1165.

• 三穗鸭
• 肌醇1, 4, 5-三磷酸受体2型(IP3R2)蛋白结构域
• 子宫内膜上皮细胞
• 2+分泌" name="keyword">Ca2+分泌
• 蛋壳品质

肌醇1, 4, 5-三磷酸受体2型(inositol 1,4,5-triphosphate receptor type 2, IP3R2)是位于内质网的细胞内Ca2+释放通道，通过调控Ca2+释放而影响蛋壳品质。为阐明IP3R2蛋白结构域对鸭(Anas platyrhyncha domestica)子宫内膜上皮细胞Ca2+分泌的调控效应及其对钙转运相关基因的影响，本研究以蛋鸭品种三穗鸭为研究对象，构建IP3R2蛋白结构域的表达载体pCDNA3.1-IP3R2，转染至鸭子宫内膜上皮细胞，以Flag标签ELISA检测试剂盒确定IP3R2蛋白结构域的表达量；以Fluo-3/AM钙离子荧光标记检测胞内Ca2+含量；以qPCR检测不同结构域过表达量及离子转运相关基因的mRNA水平。结果显示，MIR、RYDR＿ITPR(1)、RYDR＿ITPR(2)、RIH＿assoc和Ion＿trans结构域过表达均引起鸭子宫内膜上皮细胞内Ca2+浓度下降；RYDR＿ITPR(1)和IP3R2-Ion＿trans的表达量与胞内Ca2+浓度显著负相关(P<0.05);RYDR＿ITPR(2)、RIH＿assoc和5个结构域共转染的表达量与胞内Ca2+浓度极显著负相关(P<0.01);RYDR＿ITPR(2)结构域表达量与RYR2、KCNJ15和CA2基因表达量呈显著正相关(P<0.05);MIR结构域过表达量与IP3R1、CALB1和CA2的基因表达量呈现显著正相关(P<0.05),2个RYDR＿ITPR结构域过表达量均与KCNJ15和RYR2基因表达量呈显著正相关(P<0.05);RIH＿assoc结构域过表达量与IP3R2和ORAI1基因表达量呈显著正相关(P<0.05);Ion＿trans结构域过表达量与CALB1、SLC8A1和CA2基因表达量呈显著正相关(P<0.05);5个结构域共转染后的表达量与CFTR基因表达量呈显著正相关、与TRPV6呈显著负相关(P<0.05)。上述结果提示，5个IP3R2蛋白结构域的过表达可能引起鸭子宫内膜上皮细胞内Ca2+向胞外释放，对细胞中20个离子转运基因表达水平的调控效应存在差异。本研究可为分子遗传标记选择和鸭蛋壳品质提高提供参考依据。

• 单位
  动物科学学院; 贵州大学