Neuritin对非小细胞肺癌血管内皮细胞的生物学作用及其机制研究

作者：张建庆; 章恒; 王珍; 赵辉^*

来源：临床肿瘤学杂志, 2019, 24(01): 7-15.

• 非小细胞肺癌(NSCLC)
• Neuritin
• Notch1
• 血管内皮生长因子(VEGF)

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Neuritin的异常表达对肺血管内皮细胞的生物学作用及其作用机制。方法选择2017年9月至12月新疆维吾尔自治区人民医院NSCLC患者手术切除的癌组织5～10例,提取原代人NSCLC血管内皮细胞(NSCLC-VECs),原代培养经病理确诊的NSCLC患者NSCLC-VECs细胞,选择CD34及FactorⅧ经免疫组化鉴定。利用荧光定量PCR(QPCR)及Western-blotting检测NSCLC-VECs及人肺微血管内皮细胞株(HPMECs)中Neuritin的表达水平。构建过表达/敲低Neuritin的NSCLC-VECs、HPMEC细胞系及阴性对照组,MTT、细胞划痕、Transwell小室、流式细胞术分别检测转染干扰/过表达Neuritin对细胞增殖及转移能力、细胞周期、细胞凋亡的影响;扫描电镜观察转染后细胞形态的改变。结果 NSCLC-VECs细胞中的Neuritin表达显著高于HPMEC细胞(P <0. 01)。过表达Neuritin后HPMEC和NSCLC-VECs细胞内Notch1、VEGFR蛋白和mRNA表达均显著升高(P <0. 01);细胞体外增殖、划痕愈合及体外迁移能力较阴性对照组显著增强(P <0. 05);电镜下观察细胞表面伪足明显,细胞间粘连增加;同时,过表达Neuritin促进了HPMEC和NSCLC-VECs细胞周期进程,并抑制细胞凋亡(P <0. 001)。反之,干扰HPMEC和NSCLC-VECs细胞内Neuritin表达后,胞内Notch1、VEGFR蛋白和mRNA表达均受到显著抑制(P <0. 01);电镜下观察细胞表面光滑,细胞体外增殖活性、划痕愈合能力及迁移能力均较阴性对照组显著降低(P <0. 01); HPMEC和NSCLC-VECs细胞周期阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率显著升高(P <0. 001)。结论Neuritin可能作为NSCLC潜在的生物标记物,在NSCLC的发生发展中发挥一定的生物学功能。

• 单位
  新疆维吾尔自治区人民医院