牛布鲁氏杆菌外膜蛋白Omp22的原核表达及反应原性鉴定

作者：连凯琪; 周玲玲; 张明亮; 张慢; 林正丹; 宋玉伟; 王双山^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2020, (05): 1-3.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2019.05.0324

• 布鲁氏杆菌
• 外膜蛋白Omp22
• 基因扩增
• 原核表达
• 融合蛋白
• 反应原性

为了制备牛布鲁氏杆菌外膜蛋白Omp22的抗原,试验采用PCR技术扩增Omp22基因;通过PCR和双酶切技术鉴定重组质粒pET28a(+)-Omp22;应用SDS-PAGE对重组质粒pET28a(+)-Omp22的表达进行鉴定;采用Western-blot方法对表达的重组蛋白Omp22与布鲁氏杆菌阳性血清的反应原性进行分析。结果表明:PCR扩增得到Omp22基因,其大小为639 bp,共编码213个氨基酸,并成功构建重组质粒pET28a(+)-Omp22;该重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中获得表达,表达的重组蛋白Omp22能与布鲁氏杆菌阳性血清发生特异性反应。说明重组蛋白Omp22具有良好的反应原性,为后续开发诊断抗体的试剂盒奠定了基础。

• 单位
  安阳工学院