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摘要
目的 探讨黄芪多糖(APS)对低氧诱导的肺动脉高压(PAH)模型小鼠产生的肺炎症和纤维化的保护作用及机制。方法 (1) 体内实验：采用低氧舱(10%O2,90%N2)内饲养 C57BL/6 小鼠制备肺动脉高压模型。雄性野生型 C57BL/6 小鼠分为正常对照组、低氧模型组、模型+APS 200 和 400 mg·kg-1组(每日 ig给予)、模型+BAY11-7082 5 mg·kg-1组(NF-κB 抑制剂，ip 给予，每周 3 次)；钙蛋白酶 1 敲除(Capn1EK684 FN-/-)雄性小鼠分为敲除对照组和敲除低氧组；28 d 后，测定右心室压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI);HE 染色观察肺组织病理形态并检测血管壁厚度比(WTR)和血管壁面积比(WAR);Masson 染色观察肺组织胶原纤维沉积；ELISA 检测血清白细胞介素 1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子 α(TNF-α)水平及肺组织中羟脯氨酸(HYP)水平；Western 印迹法检测肺组织钙蛋白酶1、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达水平以及 NF-κB P65 蛋白磷酸化水平。(2) 体外实验：原代培养肺动脉平滑肌细胞(PASMC)分为细胞对照组、低氧组、低氧+APS 0.6 g·L-1、低氧+BAY11-7082 10 μmol?L-1和低氧+MDL-28170(钙蛋白酶 1 抑制剂)10 μmol?L-1组。除细胞对照组外，其余组加药后直接置低氧培养箱(3%O2、97%N2)培养24 h;CCK-8 法检测细胞存活率；ELISA检测细胞中IL-1β和TNF-α水平；Western 印迹法检测细胞钙蛋白酶 1、MMP-9 和 TGF-β1蛋白表达水平以及 NF-κB P65 蛋白磷酸化水平。结果 (1) 体内实验：与野生型正常对照组比较，低氧模型组小鼠RVSP、RVHI、WAR、WTR、肺组织胶原纤维沉积面积、小鼠血清中IL-1β 和 TNF-α 水平、肺组织中 HYP 水平、钙蛋白酶 1、MMP-9、TGF-β1蛋白表达水平及 NF-κB P65 磷酸化水平显著升高(P<0.05)；与低氧模型组相比，模型+APS 组、敲除低氧组和模型+BAY11-7082 组小鼠的RVSP、RVHI、WAR、WTR、肺组织胶原纤维沉积面积、血清中 IL-1β 和 TNF-α 水平、肺组织中 HYP 水平、钙蛋白酶 1、MMP-9 和 TGF-β1蛋白表达水平及 NF-κB P65 磷酸化水平显著降低(P<0.05)。(2) 体外实验：与细胞对照组相比，低氧组细胞存活率、细胞中 IL-1β 和 TNF-α 水平、钙蛋白酶 1、MMP-9、TGF-β1蛋白表达水平及 NF-κB P65 磷酸化水平显著升高(P<0.05)；与低氧组相比，低氧+APS 组、低氧+BAY11-7082 组、低氧+MDL-28170 组细胞存活率、细胞中 IL-1β 和 TNF-α 水平、钙蛋白酶 1、MMP-9、TGF-β1蛋白表达水平及NF-κB P65磷酸化水平显著降低(P<0.05)。结论 APS对低氧诱导的小鼠 PAH具有改善作用，可通过抑制钙蛋白酶1/NF-κB信号通路减轻肺组织炎症反应和纤维化反应。
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