百日咳毒素抗原检测系统的建立及其应用

作者：程会欣; 王丽婵; 张立志; 卫辰; 骆鹏; 徐树利; 薛晨宝; 王巍巍; 马国涛; 刘波; 高强; 王治伟^*

来源：微生物学免疫学进展, 2018, 46(06): 20-28.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2018.06.004

• 百日咳毒素
• 酶联免疫吸附试验
• 吸附无细胞百白破联合疫苗

目的建立吸附无细胞百白破联合疫苗中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)的ELISA测定方法,并进行验证及应用。方法以PT作为检测抗原,用高效价鼠单抗和相应的兔多抗建立双抗体夹心ELISA,确定方法的线性范围、重复性、准确性、专属性等,并进行初步应用。结果 PT质量浓度在2.5～80.0 ng/m L时线性良好,决定系数R2>0.98。该方法与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒原液、甲肝疫苗原液、乙肝疫苗原液、白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)、破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)、百日咳丝状血凝素(filamantous hemagglutinin,FHA)、黏着素(pertactin,PRN)均无明显交叉反应,重复性好,专属性较强,其他均符合常规质控要求。该抗原检测系统对生产具有指导意义,并可以正确反映原液及成品中PT的稳定性。结论建立了PT双抗体夹心ELISA检测方法,为吸附无细胞百白破联合疫苗生产过程中PT含量的质量控制提供有效的技术手段。

• 单位
  中国食品药品检定研究院; 北京科兴生物制品有限公司