摘要
目的探讨miR-582-5p对顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭与迁移的影响及其机制。方法培养鼻咽癌顺铂耐药细胞株HNE1/DDP, 分为对照组和miR-582-5p组;对照组转染miR-582-5p阴性对照试剂, miR-582-5p组转染miR-582-5p模拟物。2组细胞转染后培养48 h, 收集细胞采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-582-5p、苏氨酸激酶3(AKT3)mRNA的表达, 细胞计数(CCK)-8实验检测细胞活力, 集落形成实验检测细胞增殖能力, 划痕实验检测细胞运动能力, Transwell小室检测细胞侵袭及迁移能力, Western blot检测AKT3蛋白的表达情况。结果 (1)qRT-PCR检测对照组、miR-582-5p组miR-582-5p mRNA相对表达量分别为1.02±0.08、3.01±0.05, 差异有统计学意义(t=38.76, P<0.001)。(2)细胞活力检测结果显示, 与对照组比较, miR-582-5p组细胞培养0 h光密度(OD)值差异无统计学意义(P=1.000), 培养24、48、72 h时的OD值均降低, 差异均有统计学意义(P值均<0.001)。(3)细胞增殖能力检测结果显示, 对照组和miR-582-5p组HNE1/DDP细胞菌落数分别是(362.3±13.1)、(155.7±5.0)个, 差异有统计学意义(t=25.59, P<0.001)。(4)细胞运动、侵袭、迁移能力检测结果显示, miR-582-5p组细胞迁移率、细胞侵袭数量、细胞迁移数量分别为62.0%±5.0%、(804.3±3.8)个、(631.0±1.0)个, 对照组分别为29.3%±4.0%、(434.0±6.1)个、(373.3±7.6)个, 差异均有统计学意义(t=8.80、89.53、58.43, P值均<0.001)。(5)miR-582-5p组AKT3 mRNA、蛋白的相对表达量分别为0.99±0.07、1.34±0.02, 对照组分别为0.59±0.04、0.60±0.03, 差异均有统计学意义(t=8.64、32.03, P值均<0.001)。结论上调miR-582-5p的表达可以抑制顺铂耐药鼻咽癌细胞的增殖、侵袭与迁移能力, 其机制可能与下调AKT3的表达有关。
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