牛布鲁菌侵染对 HPT-8细胞 p38基因转录水平的影响

作者:韩玉霞; **; 张倩; 孙志华; 刘娟; 张辉; 陈创夫
来源:动物医学进展, 2015, (4): 1-6.
DOI:10.3969/j.issn.1007-5038.2015.04.001

摘要

探讨布鲁菌侵染人胚胎滋养层细胞(HPT-8)过程中对 p38基因转录的影响。用牛布鲁菌2308和 RB51株分别侵染 HPT-8细胞,在不同侵染时间点(0、4、8、12、48 h)收集细胞,提取总 RNA,反转录获得cDNA;构建 p38α、p38β和内参基因 GAPDH 的克隆质粒,并绘制3种基因扩增的标准曲线;RT-qPCR 检测p38α和 p38β基因的转录表达。结果显示,获得了 HPT-8细胞侵染前后的 cDNA,构建了 pMD18-T-p38α/p38β/GAPDH 克隆质粒,绘制了标准曲线。RT-qPCR 结果显示,布鲁菌2308和 RB51侵染滋养层细胞后(4、8、12、48 h),p38α和 p38β的相对表达量比0 h 均明显下降,差异极显著(P <0.01),布鲁菌 RB51株和2308株也存在一定差异。结果表明,在布鲁菌侵染 HPT-8细胞的过程中,p38 MAPK 信号通路被下调,提示 p38 MAPK 信号通路参与了对细胞生物学效应的调控,且这种调控作用与菌株的毒力强弱存在密切联系。

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