摘要
目的:在Jurkat细胞基础上初步探讨circ_0006689在系统性红斑狼疮(SLE)中调控白介素2(IL2)的作用机制。方法:使用慢病毒转染Jurkat细胞构建circ_0006689低表达株。用PMA、PHA活化低表达组(si-circ_0006689组)、病毒空载组(si-NC组)及未转染组(control组)细胞后通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组IL2、miR-95-5p的相对表达量;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞IL2浓度;生物信息学分析预测circ_0006689的目标miRNA及IL2的目标miRNA;双荧光素酶报告实验检测circ_0006689与miR-95-5p、miR-95-5p与IL2的靶向关系。结果:Jurkat细胞活化后IL2分泌显著增加(P<0.05);下调circ_0006689后细胞IL2表达及分泌减少(P<0.05),miR-95-5p表达水平显著升高(P<0.05)。双荧光素酶报告实验提示circ_0006689与miR-95-5p、miR-95-5p与IL2存在结合作用。结论:在Jurkat细胞中低表达circ_0006689可抑制IL2的表达;miR-95-5p可分别与circ_0006689、IL2结合;circ_0006689可能在SLE中通过竞争性结合miR-95-5p影响IL2的表达及分泌。
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单位广西医科大学第一附属医院; 中国医学科学院