丹酚酸A通过调节氧化应激抑制LPS诱导的人脐静脉血管内皮细胞NLRP3炎性小体的表达

作者：张淼; 邓悦^*; 于克英; 常丽萍; 田腾辉; 石锐; 邵笑

来源：环球中医药, 2022, 15(03): 390-395.

• 丹酚酸A
• 内皮细胞
• 氧化应激
• NLRP3炎性小体
• 动脉粥样硬化

目的 探讨丹酚酸A(salvianolic acid A,Sal A)对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）氧化应激及炎症的抑制作用。方法 脂多糖建立细胞损伤模型后，将细胞分为对照组、模型组（LPS 1μg/mL）、SalA低剂量组（LPS 1μg/mL+Sal A 6.25μmol/L）、Sal A中剂量组（LPS 1μg/mL+Sal A 12.5μmol/L）及Sal A高剂量组（LPS 1μg/mL+Sal A 25μmol/L）。采用CCK-8法检测HUVECs的活性；酶联免疫吸附法检测Sal A对炎性因子白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）表达的影响；活性氧检测剂盒检测HUVECs中活性氧（reactive oxygen species,ROS）的含量；实时荧光定量PCR检测HUVECs中受体蛋白含NLP家族Pyrin域蛋白3重组蛋白（recombinant NLR Family Pyrin domain containing protein 3,NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（adaptor protein apotosis specklike protein containing CARD,ASC）半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素（interleukin,IL）-18、IL-1β的基因表达。蛋白免疫印迹法检测NLRP3、ASC蛋白表达。结果 （1）给予LPS刺激后，与对照组比较，模型组细胞活性显著下降（P<0.05），与模型组相比，Sal A各组细胞存活率在一定范围内随药物浓度的递增而升高（P<0.05）;(2)与对照组比较，模型组细胞ROS含量显著升高（P<0.05），与模型组比较，Sal A低、中、高剂量组ROS含量显著下降（P<0.05）;(3)与对照组比较，HUVECs中NLRP3炎性小体相关指标NLRP3、ASC、Caspase-1表达显著升高（P<0.05）,Sal A低、中、高剂量组与模型组比较均显著下降（P<0.05）;(4)HUVECs中的炎性因子IL-1β、IL-18、TNF-α在给予LPS刺激后与对照组比较显著升高（P<0.05），给予Sal A后与模型组比较均有所下降（P<0.05）。结论 Sal A对LPS诱导的HUVECs损伤具有明显的保护作用，其作用机制可能是通过降低细胞中ROS并抑制NLRP3炎性小体的表达得以实现。

• 单位
  长春中医药大学附属医院; 长春中医药大学