Ⅰ-Sce I系统的建立及其在诱导肝癌细胞DNA双链断裂中的应用

作者：任精华; 何文山; 林菊生; 张强; 何星星; 陈琼; 刘瑶; 徐冬

来源：中华肝脏病杂志, 2008, (2): 101-104.

DOI：10.3321/j.issn:1007-3418.2008.02.006

• DNA损伤
• 癌
• 肝细胞
• 内切核酸酶类
• Ⅰ-Sce I系统
• γ-H2AX分析法

目的 建立Ⅰ-Sce I系统并应用该系统制备DNA双链断裂(DSB)的HepG2细胞模型,为进一步研究DSB与HBV DNA整合奠定基础.方法 通过分子克隆技术构建携带Ⅰ-Sce I内切酶识别序列的pEGFP2真核表达载体,并将其转染入肝癌细胞株HepG2,经G418筛选出稳定转染株,随后瞬时转染表达归位内切酶Ⅰ-Sce I的质粒pCMV-3NSL-Ⅰ-Sce I.24 h后采用免疫荧光法和

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院; 华中科技大学同济医学院附属协和医院