摘要
目的探讨中心体蛋白(ninein-like protein,Nlp)对人类食管癌细胞遭受DNA损伤时细胞周期调控和细胞凋亡的影响。方法用Lipofectamine2000转染和G418筛选构建稳定高表达Nlp的克隆,应用RT-PCR和Western blotting鉴定空载对照克隆和Nlp高表达克隆;采用血清饥饿法使细胞周期同步化并用UV照射处理细胞,流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡。结果筛选并鉴定出明显高表达Nlp的稳定克隆。与空载对照克隆相比,Nlp高表达的克隆G2/M期细胞增加8.1%。有丝分裂指数实验显示Nlp高表达的克隆进入M期受阻,sub-G1期比例增加,发生凋亡的细胞是对照的1....
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单位中国医学科学院; 中国协和医科大学; 分子肿瘤学国家重点实验室; 中国医学科学院肿瘤研究所; 放射医学研究所