卡介菌基因组DNA的制备及其免疫调控活性研究

作者：王静; 霍树平; 左连富; 孙树汉

来源：河北医科大学学报, 2009, 30(11): 1163-1166.

• 分枝杆菌,牛
• 基因组
• 提取法
• 小鼠

目的探索一种利用离子交换层析技术制备高纯度卡介菌基因组DNA(genomic DNA frommycobacterium bovis Bacillus calmette-Guerin,BCG-DNA)的方法,并探讨其免疫调控活性。方法运用超声、加热、胰酶消化、离子交换层析、凝胶过滤层析及冻干法制备高纯度BCG-DNA;小鼠脾细胞与BCG-DNA共同培养72h,采用ELISA方法检测细胞培养上清中干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的水平。结果所制备的BCG-DNA纯度较高(DNA 95.3%),片断大小均匀一致,集中于200～250bp;BCG DNA可显著诱导小鼠脾细胞产生IFN γ(P<0.01),且IFN-γ水平与BCG-DNA浓度呈正相关。结论利用层析法制备BCG-DNA,高效、重复性好。所制备的BCG-DNA纯度较高,具有较强的免疫调控作用。

• 单位
  河北医科大学第三医院; 河北医科大学第四医院; 中国人民解放军第二军医大学