重金属镉特异性抗体的制备及icELISA检测方法的建立

作者：柳心梅; 田巍; 冯春梅; 罗林; 孙远明; 肖治理^*

来源：现代食品科技, 2020, 36(08): 325-37.

DOI：10.13982/j.mfst.1673-9078.2020.8.0118

• 镉
• 人工抗原
• 抗血清
• icELISA

为检测食品中的重金属镉残留问题,本研究建立了基于重金属镉抗体的酶联免疫分析方法。利用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(Isothiocyanobenzyl-EDTA,ITCBE)螯合Cd2+并偶联牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA),合成了针对Cd2+的免疫原Cd-ITCBE-BSA和包被原Cd-ITCBE-OVA,通过紫外扫描鉴定说明偶联成功;以Cd-ITCBE-BSA免疫Balb/c小鼠,制备出Cd2+抗血清并对其免疫学特性进行鉴定,进一步说明了抗原合成成功,在此基础上进行了条件优化并建立了针对镉的icELISA检测方法。方法的检测限(IC10)为0.18 ng/mL,IC50为1.15 ng/mL,线性检测范围(IC20～IC80)为0.24～5.54 ng/mL。除了与Hg2+有2.16%的交叉反应率,该方法对Pb2+、Fe3+、Cu2+和Cr3+交叉反应率均小于0.3%,板内变异系数和板间变异系数都低于10%。此抗体特异性强灵敏度高,建立的icELISA方法可应用于食品中重金属镉的快速检测。

• 单位
  华南农业大学; 广东省食品质量安全重点实验室; 国家粮食和物资储备局科学研究院