摘要
为评估脂多糖(LPS)对子宫内膜免疫屏障的影响,本研究首先以LPS对妊娠小鼠进行灌胃后检测其对繁殖性能的影响,确认LPS可显著抑制母鼠的受孕率和仔鼠成活率(P<0.05),造成仔鼠生长性能的下降,表明本研究采用小鼠作为动物模型具有可行性。进一步分别在妊娠第7 d、妊娠第14 d和分娩后第5 d采集LPS灌服组[LPS(+)]和健康对照组[LPS(-)]母鼠子宫,采用相应ELISA试剂盒检测子宫内膜主要黏蛋白(Mucins)MUC1,MUC2和MUC4的含量;采用Western blot检测子宫内膜上皮细胞紧密连接蛋白Claudin,Occludin,ZO-1,JAM,ECadherin的表达量。ELISA结果显示:与LPS(-)组相比,妊娠第7 d时LPS(+)组母鼠子宫内膜中MUC1,MUC2和MUC4的含量均极显著减少(P<0.01),妊娠第14 d时均显著升高(P<0.05),但妊娠期间LPS(+)组母鼠子宫内膜上MUC1,MUC2和MUC4的总量均极显著低于LPS(-)组(P<0.01);而分娩后两组各黏蛋白含量和总量均无显著差异(P>0.05)。Western blot检测结果显示,与LPS(-)组相比,LPS(+)组母鼠子宫内Occludin的表达量在妊娠7 d时显著降低(P<0.05),在妊娠14 d时显著增高(P<0.05);ZO-1的表达量在妊娠7 d时显著增高(P<0.05);JAM的表达量在妊娠14 d时显著降低(P<0.05);E-Cadherin的表达量在妊娠7 d、妊娠14 d时显著下降。上述结果首次证实了当子宫内膜受到LPS的刺激之后,在妊娠第7 d时,子宫内膜黏蛋白的含量降低,子宫内膜上皮细胞紧密连接相关蛋白Occludin,JAM和E-Cadherin的表达量显著减少;在妊娠第14 d,子宫内膜黏蛋白的表达量上升,起到屏障和保护胎儿的作用,此时紧密连接相关蛋白Claudin,JAM和E-Cadherin仍受到不同程度的损害,但紧密连接的调节蛋白Occludin表达量上调;分娩后5 d,LPS对黏蛋白和紧密连接均无显著影响。本研究为LPS所致家畜子宫内膜炎从而引发繁殖性能障碍的机制提供了科学依据。
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单位东北农业大学; 哈尔滨体育学院